如何將講實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)訓(xùn)練成幫手
實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)用對了是“幫手”，用錯(cuò)了就是“殺手”！
就拿植物dna提取來說，原理就是去掉植物細(xì)胞壁，細(xì)胞膜，質(zhì)體，線粒體，葉綠體然后剩下細(xì)胞核了，這就是我們需要的DNA。
通常采用機(jī)研磨的方法破碎植物的組織和細(xì)胞，由于植物細(xì)胞勻漿含有多種酶類(尤其是氧化酶類)對DNA的抽提產(chǎn)生不利的影響，在抽提緩沖液中需加入抗氧化劑或強(qiáng)還原劑(如巰基乙醇)以降低這些酶類的活性。在液氮中研磨，材料易于破碎，并減少研磨過程中各種酶類的作用。
十二烷基肌酸鈉、十六烷基三甲基溴化銨簡稱為CTAB、十二烷基硫酸鈉簡稱SDS，等離子型表面活性劑，能溶解細(xì)胞膜和核膜蛋白，使核蛋白解聚，從而使DNA得以游離出來。再加入苯酚和氯仿等有機(jī)溶劑，能使蛋白質(zhì)變性，并使抽提液分相，因核酸(DNA、RNA)水溶性很強(qiáng)，經(jīng)離心機(jī)離心后即可從抽提液中除去細(xì)胞碎片和大部分蛋白質(zhì)。上清液中加入無水乙醇使DNA沉淀，沉淀DNA溶于TE溶液中，即得植物總DNA溶液。
雖然提取植物葉片的DNA比較簡單，用下離心機(jī)再根據(jù)植物,找段基因的序列設(shè)計(jì)引物，再順勢PCR一下了,看看個(gè)能把這段基因擴(kuò)出來，整個(gè)過程其實(shí)需要用的到的設(shè)備并不多，重要的就離心機(jī)跟PCR儀器。
但是這里面需要注意的細(xì)節(jié)有很多，比如：
使用實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)的注意事項(xiàng)：
1. 離心機(jī)在預(yù)冷狀態(tài)時(shí)，離心機(jī)蓋必須關(guān)閉，離心結(jié)束后取出轉(zhuǎn)頭要倒置于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，擦干腔內(nèi)余水，離心機(jī)蓋處于打開狀態(tài)。
2. 轉(zhuǎn)頭在預(yù)冷時(shí)轉(zhuǎn)頭蓋可擺放在離心機(jī)的平臺(tái)上，或擺放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，千萬不可不擰緊浮放在轉(zhuǎn)頭上，因?yàn)橐坏┱`啟動(dòng)，轉(zhuǎn)頭蓋就會(huì)飛出，造成事故！
3. 轉(zhuǎn)頭蓋在擰緊后一定要用手指觸摸轉(zhuǎn)頭與轉(zhuǎn)蓋之間有無縫隙，如有縫隙要擰開重新擰緊，直至確認(rèn)無縫隙方可啟動(dòng)離心機(jī)。
4. 在離心過程中，操作人員不得離開離心機(jī)室，一旦發(fā)生異常情況操作人員不能關(guān)電源(POWER），要按STOP 。在預(yù)冷前要填寫好離心機(jī)使用記錄。
5. 不得使用偽劣的離心使管，不得用老化、變形、有裂紋的離心管。
6. 離心機(jī)套管底部要墊棉花或試管墊。
7. 電動(dòng)離心機(jī)如有噪音或機(jī)身振動(dòng)時(shí)，應(yīng)立即切斷電源，即時(shí)排除故障。
8. 離心管必須對稱放入套管中，防止機(jī)身振動(dòng)，若只有一支樣品管另外一支要用等質(zhì)量的水代替。
9. 啟動(dòng)離心機(jī)時(shí)，應(yīng)蓋上離心機(jī)頂蓋后，方可慢慢啟動(dòng)。
10. 分離結(jié)束后，先關(guān)閉離心機(jī)，在離心機(jī)停止轉(zhuǎn)動(dòng)后，方可打開離心機(jī)蓋，取出樣品，不可用外力強(qiáng)制其停止運(yùn)動(dòng)。
使用PCR儀器的注意事項(xiàng)：
(1)PCR儀使用的環(huán)境要恒定，工作環(huán)境的溫度不能過高或過低，最好在用空調(diào)的房間使用，有些PcR儀有溫度保護(hù)程序，在過低的溫度下機(jī)器不能啟動(dòng)。
(2)電源要穩(wěn)定，工作的電壓不能波動(dòng)過大，波動(dòng)過大會(huì)造成電子器件損壞，一般建議將PcR儀電源接于穩(wěn)壓電源上。
但是要注意的是，不論是離心機(jī)還是PCR儀器，使用前都要詳細(xì)閱讀使用說明書，遇到不能解決的問題不要隨意拆卸機(jī)器，應(yīng)該讓生產(chǎn)廠商負(fù)責(zé)售后服務(wù)的專業(yè)工程師進(jìn)行處理。
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