高速離心機(jī)親水材質(zhì)有效對接梯度介質(zhì)
發(fā)布時間:2017-6-16 18:58:4??????點擊:
高速離心機(jī)具有外型美觀、含量大、體積小、重量輕、噪聲低、振動小、定時控制等優(yōu)點??晒┭獫{、血清、尿素及疫苗制造等離心沉淀分離用。隨著分子生物學(xué),遺傳工程研究和應(yīng)用的發(fā)展,離心分離技術(shù)也經(jīng)歷了數(shù)代更換,由低速離心機(jī),高速離心機(jī),超速離心機(jī)到超速冷凍離心機(jī),超大容量冷凍離心機(jī)。
高速離心機(jī)將裝有不均一顆粒的離心管在臺式大容量冷凍離心機(jī)中高速旋轉(zhuǎn),大小、密度不同的顆粒會以各自的沉降速率移向離心管底部。如果設(shè)計一定的轉(zhuǎn)速和時間,沉降速率最大的首先沉降到離心管底部,沉降速率中等和較小的組分繼續(xù)留在上清液中。將上清液轉(zhuǎn)移到另一離心管中,提高轉(zhuǎn)速并掌握一定的時間,可獲得沉降速率中等的組分。如此反復(fù)操作,可實現(xiàn)不同組分的分離。
高速離心機(jī)驅(qū)動系統(tǒng)由電機(jī)、驅(qū)動軸和減震機(jī)構(gòu)等組成。采用交流變頻電機(jī),密封預(yù)潤滑式驅(qū)動軸,減震機(jī)構(gòu)降低了離心機(jī)工作時的振動和噪音。高速離心機(jī)制備的提副業(yè)是凹狀梯度時,與凸?fàn)钐荻认喾?,最先從混合室里流到離心管的是重端梯度液,制備時,輕液要緩慢的鋪上,因而要求針頭以相應(yīng)的速度抬起,在多數(shù)情況下,只是簡單的將離心管斜放一定角度,將針頭烤放于離心管口,使溶液沿管壁緩緩流下,逐步鋪上,加完后,再把離心管垂直放好加樣。此時應(yīng)注意的是,所選用高速離心機(jī)離心管的材料最好是親水性的,如是憎水性離心管,可用一些鹽,這樣再加入梯度溶液時,可保證均勻的流下。
高速離心機(jī)梯度介質(zhì)的選用:
?。?)鹽梯度介質(zhì)。
?。?)小分子有機(jī)物如蔗糖。
(3)三碘化苯衍生物。
?。?)有機(jī)高聚物。
?。?)膠態(tài)二氧化硅。
高速離心機(jī)梯度的密度范圍:
?。?)速率區(qū)帶離心的介質(zhì)密度小于樣品中各種顆粒的密度。
?。?)等密度區(qū)帶離心的介質(zhì)密度大于樣品中各種顆粒的密度。
高速離心機(jī)梯度的容量:
指在達(dá)到分離要求的前提下,梯度介質(zhì)容納樣品的最大數(shù)量。
(1)與樣品組成和分離要求有關(guān)。
?。?)與梯度總體積、斜率和介質(zhì)粘度有關(guān)。
?。?)與轉(zhuǎn)速和轉(zhuǎn)子形式有關(guān)。
高速離心機(jī)為了密度梯度和樣品區(qū)帶的穩(wěn)定,加到密度梯度液柱頂部樣品的密度必須小于梯度液頂部的密度,如果不是這樣,樣品將以塌陷的方式通過梯度,直到到達(dá)等密度區(qū)。高速離心機(jī)在這個過程中樣品層將明顯的擴(kuò)展,纏上的小滴沉降會造成區(qū)帶分辨力下降。
高速離心機(jī)將裝有不均一顆粒的離心管在臺式大容量冷凍離心機(jī)中高速旋轉(zhuǎn),大小、密度不同的顆粒會以各自的沉降速率移向離心管底部。如果設(shè)計一定的轉(zhuǎn)速和時間,沉降速率最大的首先沉降到離心管底部,沉降速率中等和較小的組分繼續(xù)留在上清液中。將上清液轉(zhuǎn)移到另一離心管中,提高轉(zhuǎn)速并掌握一定的時間,可獲得沉降速率中等的組分。如此反復(fù)操作,可實現(xiàn)不同組分的分離。
高速離心機(jī)驅(qū)動系統(tǒng)由電機(jī)、驅(qū)動軸和減震機(jī)構(gòu)等組成。采用交流變頻電機(jī),密封預(yù)潤滑式驅(qū)動軸,減震機(jī)構(gòu)降低了離心機(jī)工作時的振動和噪音。高速離心機(jī)制備的提副業(yè)是凹狀梯度時,與凸?fàn)钐荻认喾?,最先從混合室里流到離心管的是重端梯度液,制備時,輕液要緩慢的鋪上,因而要求針頭以相應(yīng)的速度抬起,在多數(shù)情況下,只是簡單的將離心管斜放一定角度,將針頭烤放于離心管口,使溶液沿管壁緩緩流下,逐步鋪上,加完后,再把離心管垂直放好加樣。此時應(yīng)注意的是,所選用高速離心機(jī)離心管的材料最好是親水性的,如是憎水性離心管,可用一些鹽,這樣再加入梯度溶液時,可保證均勻的流下。
高速離心機(jī)梯度介質(zhì)的選用:
?。?)鹽梯度介質(zhì)。
?。?)小分子有機(jī)物如蔗糖。
(3)三碘化苯衍生物。
?。?)有機(jī)高聚物。
?。?)膠態(tài)二氧化硅。
高速離心機(jī)梯度的密度范圍:
?。?)速率區(qū)帶離心的介質(zhì)密度小于樣品中各種顆粒的密度。
?。?)等密度區(qū)帶離心的介質(zhì)密度大于樣品中各種顆粒的密度。
高速離心機(jī)梯度的容量:
指在達(dá)到分離要求的前提下,梯度介質(zhì)容納樣品的最大數(shù)量。
(1)與樣品組成和分離要求有關(guān)。
?。?)與梯度總體積、斜率和介質(zhì)粘度有關(guān)。
?。?)與轉(zhuǎn)速和轉(zhuǎn)子形式有關(guān)。
高速離心機(jī)為了密度梯度和樣品區(qū)帶的穩(wěn)定,加到密度梯度液柱頂部樣品的密度必須小于梯度液頂部的密度,如果不是這樣,樣品將以塌陷的方式通過梯度,直到到達(dá)等密度區(qū)。高速離心機(jī)在這個過程中樣品層將明顯的擴(kuò)展,纏上的小滴沉降會造成區(qū)帶分辨力下降。
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